遵循显微镜设计须符合样品要求的原则,创建了一套完全模块化的成像平台,可以满足多种实验需求。与传统的研究技术(例如使用微电极)相比,我们的多光子成像系统能够以更快速度、更大深度和更高强度同时读出和操纵神经元群。我们开发了一个旋转主体,使显微镜可绕样品旋转。我们还提供各种刚性主体,其具7.74英寸高度,可围绕物镜提供较大的三维工作空间。
神经元活动的体内体积成像需要亚微米级空间分辨率和毫秒级时间分辨率。传统方法通过连续扫描衍射高斯光束以创建3D图像,而基于贝塞尔光束的多光子成像依靠轴向延伸的焦点来捕获体积图像。激发光束的扩展景深可创建3D体积的2D投影,从而有效地将2D帧速率转换为3D体积速率。
三光子激发非常适合深层组织成像,且需要高脉冲能量激发源,通常在1300 nm或1700 nm附近。与双光子成像相比,三光子成像可减少组织散射并降低离焦背景,从而提高信噪比。
Thorlabs的空间光调制器(SLM)使用全息图案来同时刺激样品中多个位置的光活化。SLM设计用于通过飞秒脉冲进行双光子激发,SLM可控制激励激光束轮廓上的相位以生成数百个用户确定的焦点。